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              濾紙保藏法

              原理

              微生物具有容易變異的特性,因此,在保藏過程中,必須使微生物的代謝處于最不活躍或相對靜止的狀態,才能在一定的時間內使其不發生變異而又保持生活能力。
               
              選用優良菌株,根據生理生化特征隔絕空氣使其處于休眠狀態或者代謝處于最低的狀態,生長繁殖受抑制從而降低變異率。

              細菌、酵母菌、絲狀真菌均可用此法保藏,前兩者可保藏2年左右,有些絲狀真菌甚至可保藏14-17年之久。此法較液氮、冷凍干燥法簡便,不需要特殊設備。
               

              材料與儀器

              細菌 酵母菌 放線菌 霉菌
              肉膏蛋白胨斜面培養基 滅菌水 滅菌脫脂牛乳 五氧化二磷
              濾紙 安瓿管 棉塞 滅菌鍋 培養皿 試管 鑷子 干燥器 溫箱 酒精燈 冰箱 真空泵 真空壓力表
               

              步驟

              一、將濾紙剪成0.5×1.2 cm的小條,裝入0.6×8 cm的安瓿管中,每管1-2張,塞以棉塞,1.05 kg/cm2,121.3℃滅菌30分鐘。
               
              二、將需要保存的菌種,在適宜的斜面培養基上培養,使充分生長。
               
              三、取滅菌脫脂牛乳1-2 ml滴加在滅菌培養皿或試管內,取數環菌苔在牛乳內混勻,制成濃懸液。
               
              四、用滅菌鑷子自安瓿管取濾紙條浸入菌懸液內,使其吸飽,再放回至安瓿管中,塞上棉塞。
               
              五、將安瓿管放入內有五氧化二磷作吸水劑的干燥器中,用真空泵抽氣至干。
               
              六、將棉花塞入管內,用火焰熔封,保存于低溫下。
               
              七、需要使用菌種,復活培養時,可將安瓿管口在火焰上燒熱,滴一滴冷水在燒熱的部位,使玻璃破裂,再用鑷子敲掉口端的玻璃,待安瓿管開啟后,取出濾紙,放入液體培養基內,置溫箱中培養。
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