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              微孔濾膜過濾除菌實驗

              簡介

              過濾除菌是通過機械作用濾去液體或氣體中細菌的方法。根據不同的需要選用不同的濾器 和濾板材料。此法除菌的最大優點是可以不破壞溶液中各種物質的化學成分,但由于濾量有限,所以一般只適用于實驗室中小量溶液的過濾除菌,較大量溶液的濾菌裝置,如水的細菌學檢査,見濾膜法測定水中大腸菌群實驗。

              原理

              微孔濾膜過濾器是由上下二個分別具有出口和入口連接裝置的塑料蓋盒組成,出口處可連接針頭,入口處可連接針筒,使用時將濾膜裝入兩塑料蓋盒之間,旋緊蓋盒,當溶液從針筒注入濾器時,此濾器將各種微生物阻留在微孔濾膜上面,從而達到除菌的目的。根據待除菌溶液量的多少,可選用不同大小的濾器。
              材料與儀器肉湯蛋白胨平板

              2% 的葡萄糖溶液
              注射器 微孔濾膜過濾器 0.22μm 濾膜 無菌試管 鑷子 玻璃刮棒

              步驟

              1. 組裝、滅菌

              將 0.22 μm 孔徑的濾膜裝入清洗干凈的塑料濾器中,旋緊壓平,包裝滅菌后待用(0.1 MPa, 121.5℃ 滅菌 20 min)。

              2. 連接

              將滅菌濾器的入口在無菌條件下,以無菌操作方式連接于裝有待濾溶液(2% 葡萄糖溶液)的注射器上,將針頭與出口處連接并插入帶橡皮塞的無菌試管中,見圖 VI-5。

              3. 壓濾

              將注射器中的待濾溶液加壓緩緩擠入過濾到無菌試管中,濾畢,將針頭拔出。

              4. 無菌檢査

              無菌操作吸取除菌濾液 0.1 ml 于肉湯蛋白胨平板上,涂布均勻,置 37℃ 溫室中培養 24 h,檢査是否有菌生長。

              5. 清洗

              棄去塑料濾器上的微孔濾膜,將塑料濾器清洗干凈,并換上一張新的微孔濾膜,組裝包扎,再經滅菌后使用。

              注意事項

              1. 壓濾時,用力要適當,不可太猛太快,以免細菌被擠壓通過濾膜。

              2. 整個過程應在無菌條件下嚴格無菌操作,以防污染。過濾時應避免備連接處出現滲透現象。

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